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本试剂盒采用高效、专一结合核酸的离心吸附柱和独特的缓冲系统，适合从各种不同的新鲜或冻存植物组织中提取基因组DNA，并可最大限度去除植物组织中的杂质。本试剂盒无需使用酚/氯仿抽提，操作安全。提取的基因组DNA片段大、纯度高、质量稳定可靠，适用于PCR、荧光定量PCR、分子标记、文库构建等实验。

• 样品应避免反复冻融，否则会导致提取的DNA片段较小且提取量下降。
  
• 第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明在Buffer LP3和Buffer GW2中加入无水乙醇。使用前请检查Buffer LP1和Buffer LP2是否出现结晶或者沉淀，如有结晶或者沉淀，请将Buffer LP1和Buffer LP2于56℃水浴重新溶解。

• 取植物新鲜组织100mg左右或干重组织约20mg，加入液氮充分研磨。
  
• 将研磨后的粉末收集到离心管（自备）中，加入400μL Buffer LP1和6μL RNase A（10mg/mL），涡旋振荡1分钟，室温放置10分钟，使其充分裂解。
  注意：
  
  • 使用涡旋振荡或移液器吹打，充分裂解组织，组织裂解不完全会影响最终的DNA得率。
    
  • 请勿在使用前将Buffer LP1与RNase A混合。
• 加入130μL Buffer LP2，混匀，涡旋震荡1分钟。
  
• 12000rpm（~13400×g）离心5分钟，将上清移至新的离心管（自备）中。
  
• 加入1.5倍体积的Buffer LP3（使用前检查是否已加入无水乙醇），充分混匀（如500μL滤液加入750μL Buffer LP3）。
  注意：加入Buffer LP3后应立即混匀，可能会产生沉淀但不影响后续实验。
  
• 将上步所得溶液和沉淀全部加入到已装入收集管的吸附柱DM中，若一次不能加完溶液，可分多次转入。12000rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
  
• 向吸附柱中加入500μL Buffer GW2（使用前检查是否已加入无水乙醇），12000rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
  注意：如吸附膜呈现绿色，向吸附柱中加入500μL无水乙醇，12000rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
  
• 重复步骤7.
  
• 12000rpm离心2分钟，倒掉收集管中的废液。将吸附柱置于室温数分钟，以彻底晾干。
  注意：这一步的目的是将吸附柱中残余的乙醇去除，乙醇的残留会影响后续的酶促反应（酶切、PCR等）。
  
• 将吸附柱放到一个新离心管（自备）中，向吸附膜的中间部位悬空滴加50～100μL Buffer GE或灭菌水，室温放置2～5分钟，12000rpm离心1分钟，收集DNA溶液。-20℃保存DNA。
  注意：
  
  • 如果下游实验对pH值或EDTA敏感，可以用灭菌水洗脱。洗脱液的pH值对洗脱效率有很大影响，若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0～8.5（可以用NaOH将水的pH值调到此范围），pH值低于7.0时洗脱效率不高。
    
  • 离心之前室温孵育5分钟可以增加产量。
    
  • 如果要提高DNA的终浓度，可以将步骤10所得的DNA洗脱液重新加至吸附膜上，重复步骤10；若洗脱体积小于100μL，可以增加DNA的终浓度，但可能会减少DNA的总产量。如果所得DNA的量小于1μg，推荐用50μL Buffer GE进行洗脱。
    
  • 因为保存在水中的DNA会受到酸性水解作用的影响，如需长期保存，推荐用Buffer GE洗脱并于-20℃保存。